Anti-Müller-Hormon (ELISA)

Anti-Müller-Hormon-AMH-Immunenzymatisches Elisa-AMH-Testkit
Produktbeschreibung:

Der AMH-Assay ist ein Enzymimmunoassay (ELISA) zur quantitativen In-vitro-Bestimmung des Anti-Müller-Hormons (AMH) in menschlichem Serum. Nur für den professionellen Gebrauch.

Zusammenfassung

Anti-Müller-Hormon (AMH) ist ein Glykoproteinhormon, das strukturell mit Inhibin und Aktivin aus der Beta-Superfamilie der transformierenden Wachstumsfaktoren verwandt ist und deren Schlüsselrollen in der Wachstumsdifferenzierung und Follikulogenese liegen.1

Bei männlichen Föten wird AMH von den Sertoli-Zellen produziert und induziert eine Regression des Müller-Gangs und fördert daher die Entwicklung des männlichen Fortpflanzungstrakts.2 Männliche Säuglinge haben einen sehr hohen AMH-Spiegel (>30 ng/ml), der bis nach der Pubertät langsam abnimmt und dort auf einem niedrigen Wert (<10 ng/ml) bleibt.3,4

Bei Frauen beginnt die Produktion von AMH kurz nach der Geburt, wobei die Konzentration bis zur Pubertät ansteigt. Nach der Pubertät sinkt der AMH-Spiegel im Blut bis zur Menopause, wo er nahezu nicht mehr nachweisbar ist (<0,1 ng/ml). Die AMH-Konzentration im weiblichen Blut wurde wiederholt mit der Eierstockreserve in Verbindung gebracht und lieferte so einen Hinweis auf die verbleibende reproduktive Lebensspanne der Patientinnen. Darüber hinaus sind hohe AMH-Werte (>4,7 ng/ml, 80 % KI) bei Frauen ein Hinweis auf das polyzystische Ovarialsyndrom (PCOS).5

Wenn der AMH-Spiegel bei Frauen unter 1,0 ng/ml sinkt, wird davon ausgegangen, dass sie über geringe Eierstockreserven verfügen. Patienten in diesen Bereichen wird empfohlen, die Familienplanung nicht zu verzögern oder sich einer Unfruchtbarkeitsbehandlung wie einer In-vitro-Fertilisation zu unterziehen.5,6

Das AMH-ELISA-Kit kann verwendet werden, um den Fortschritt der Unfruchtbarkeitsbehandlungen von Patienten zu überwachen und den Beginn der Wechseljahre abzuschätzen.

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Anwendungen:

Anti-Müller-Hormon (AMH) ist ein Hormon, das von den Eierstöcken produziert wird, und seine Konzentration kann die Eierstockreserve einer Frau widerspiegeln, also die Anzahl der Eizellen, die sie hat. AMH ELISA (Enzyme-linked Immunosorbent Assay) ist eine häufig verwendete Testmethode, mit der die AMH-Konzentration im Blut gemessen werden kann. AMH ELISA hat ein breites Anwendungsspektrum in folgenden Aspekten:

1. **Fruchtbarkeitsplanung**: Die AMH-Konzentration kann zur Beurteilung des Fruchtbarkeitspotenzials einer Frau herangezogen werden. Höhere AMH-Werte weisen im Allgemeinen auf eine reichhaltige Eierstockreserve hin, während niedrigere AMH-Werte auf eine verringerte Eierstockreserve hinweisen können, was sich negativ auf die Fruchtbarkeit auswirken kann.

2. **Unfruchtbarkeitsbewertung**: Bei Frauen, die sich einer Unfruchtbarkeitsbehandlung unterziehen, kann der AMH-Test Ärzten dabei helfen, ihre Eierstockreserve zu beurteilen und die Wahl der Behandlungsoptionen zu unterstützen.

3. **Bewertung der Ovulationsfunktion**: Die AMH-Konzentration kann zur Beurteilung der Ovulationsfunktion einer Frau verwendet werden, insbesondere in Fällen im Zusammenhang mit dem polyzystischen Ovarialsyndrom (PCOS).

4. **Überwachung der Eierstockfunktion**: Die AMH-Konzentration kann auch zur Überwachung der Eierstockfunktion einer Frau verwendet werden, beispielsweise nach einer Chemotherapie oder Strahlentherapie oder vor und nach einer Operation.

5. **Vorhersage des Fruchtbarkeitsalters**: Die Bewertung der AMH-Konzentration kann Frauen helfen, ihr gebärfähiges Alter zu verstehen. Niedrigere AMH-Werte können bedeuten, dass sie früher in die Wechseljahre kommen, was für die Familienplanung von entscheidender Bedeutung ist.

Zusammenfassend lässt sich sagen, dass der AMH-ELISA einen wichtigen Anwendungswert bei der Fruchtbarkeitsplanung, der Beurteilung der Unfruchtbarkeit, der Beurteilung der Ovulationsfunktion, der Überwachung der Eierstockfunktion und der Vorhersage des gebärfähigen Alters hat.

Anpassung:

Produktanpassungsdienste:

Markenname: Biovantion

Modellnummer: 0081

Herkunftsort: China

Zertifizierung: ISO13485

Mindestbestellmenge: 50

Preis: Verhandelbar

Lieferzeit: 7-15 Tage

Probentyp: Serum/Plasma

Testmethode: ELISA

Haltbarkeit: 24 Monate

Lagertemperatur: 2–30 °C

Anwendung: Klinik, Krankenhaus, Labor/Heim

Zusätzliche Funktionen: Selbsttest, Hilfsmittel, Urin

Testprinzip:

Sandwich-Prinzip. Gesamtdauer des Tests: 80 Minuten.

• Probe, Anti-AMH-beschichtete Mikrotiterplatten und enzymmarkiertes Anti-AMH werden kombiniert.

• Während der Inkubation kann das in der Probe vorhandene AMH gleichzeitig mit den beiden Antikörpern reagieren, was dazu führt, dass die AMH-Moleküle zwischen der Festphase und den enzymgebundenen Antikörpern eingeschlossen werden.

• Nach dem Waschen entsteht durch immunologische Reaktionen ein Komplex zwischen der Festphase, dem AMH in der Probe und enzymgebundenen Antikörpern.

• Anschließend wird Substratlösung zugegeben und durch diesen Komplex katalysiert, was zu einer chromogenen Reaktion führt. Die resultierende chromogene Reaktion wird als Absorption gemessen.

• Die Absorption ist proportional zur AMH-Menge in der Probe.

Vorsichtsmaßnahmen und Warnungen:

• Nur für die In-vitro-Diagnostik.

• Beachten Sie die üblichen Vorsichtsmaßnahmen beim Umgang mit allen Laborreagenzien.

• Die Entsorgung des gesamten Abfallmaterials sollte gemäß den örtlichen Richtlinien erfolgen.

• Verwenden Sie keine Reagenzien nach Ablauf des angegebenen Verfallsdatums.

• Komponenten aus Kits mit unterschiedlichen Chargencodes dürfen nicht gemischt oder verwendet werden.

• Alle Proben- und Reaktionsabfälle sollten als potenziell biologisch gefährlich eingestuft werden. Der Umgang mit Proben und Reaktionsabfällen sollte im Einklang mit den örtlichen Vorschriften und Richtlinien erfolgen.

• Die Stopplösung enthält Schwefelsäure, die schwere Verbrennungen verursachen kann. Bei Augenkontakt sofort mit viel Wasser ausspülen und ärztlichen Rat einholen.

• Neutralisierte Säuren und andere flüssige Abfälle sollten durch Zugabe einer ausreichenden Menge Natriumhypochlorit dekontaminiert werden, um eine Endkonzentration von mindestens 1,0 % zu erreichen. Um eine wirksame Dekontamination sicherzustellen, kann eine 30-minütige Einwirkung von 1,0 %igem Natriumhypochlorit erforderlich sein.

• Einige Reagenzien enthalten 0,05 % oder 0,1 % ProClin 300, was bei Hautkontakt zu einer Sensibilisierung führen kann und daher vermieden werden muss. Reagenzien und ihre Behälter müssen sicher entsorgt werden. Bei Verschlucken sofort ärztlichen Rat einholen und Verpackung oder Etikett vorzeigen.

• Substrat wirkt reizend auf Haut und Schleimhäute. Bei möglichem Kontakt Augen mit reichlich Wasser und Haut mit Seife und reichlich Wasser spülen. Kontaminierte Gegenstände vor der Wiederverwendung waschen. Bei Einatmen die Person an die frische Luft bringen.

• Informationen zu den im Kit enthaltenen gefährlichen Substanzen finden Sie im Materialsicherheitsdatenblatt (MSDS), das auf Anfrage erhältlich ist.

• Im Arbeitsbereich nicht rauchen, trinken, essen oder Kosmetika auftragen.

• Pipettieren Sie nicht mit dem Mund. Tragen Sie beim Umgang mit Proben und Reagenzien Schutzkleidung, Einweghandschuhe und Augen-/Gesichtsschutz. Nach Gebrauch Hände waschen.

• Wenn eines der Reagenzien mit der Haut oder den Augen in Kontakt kommt, waschen Sie den Bereich gründlich mit Wasser.

Lagerung und Stabilität

• Bei 2-8℃ lagern.

• Versiegeln Sie unbenutzte Reagenzien und stellen Sie sie wieder auf 2–8 °C zurück. Unter diesen Bedingungen bleibt die Stabilität zwei Monate lang oder bis zum angegebenen Verfallsdatum erhalten, je nachdem, welcher Zeitpunkt früher liegt.

Probenentnahme und VorbereitungRation

• Für diesen Test wird Humanserum empfohlen.

• Verschließen Sie die Proben und lagern Sie sie nicht länger als 8 Stunden bei 18–25 °C. Stabil für 7 Tage bei 2-8℃ und 1 Monat bei -20℃. Nur einmal einfrieren.

• Keine hitzeinaktivierten Proben verwenden.

• Sedimente und suspendierte Feststoffe in Proben können das Testergebnis beeinträchtigen und sollten durch Zentrifugieren entfernt werden. Stellen Sie sicher, dass vor der Zentrifugation eine vollständige Gerinnselbildung in den Serumproben stattgefunden hat.

• Vermeiden Sie stark hämolytische, lipämische oder trübe Proben.

Kalibrierung

Der AMH-ELISA wurde anhand des Codes 16/190 des National Institute for Biological Standards and Control (NIBSC) standardisiert.

Eine Neukalibrierung wird empfohlen, wenn eine neue Reagenzcharge verwendet wird oder die Qualitätskontrollen außerhalb des angegebenen Bereichs liegen.

Qualitätskontrolle

Zur Überwachung der Testleistung sollte jedes Labor über Testkontrollen im niedrigen, normalen und erhöhten Bereich verfügen. Die Kontrollen sollten als Unbekannte behandelt und die Werte in jedem durchgeführten Testverfahren ermittelt werden. Die empfohlene Kontrollanforderung für diesen Test besteht darin, Materialien zur Echtheitskontrolle separat zu erwerben und sie zusammen mit den Proben im selben Lauf zu testen. Das Ergebnis ist gültig, wenn die Kontrollwerte innerhalb der auf den Etiketten aufgedruckten Konzentrationsbereiche liegen.

Waschlösung (40X Verdünnung)

Fügen Sie entionisiertes Wasser zum 40-fach konzentrierten Waschlösungskonzentrat hinzu.

Verdünnen Sie 25 ml Waschlösungskonzentrat mit 975 ml entionisiertem Wasser auf ein Endvolumen von 1000 ml. Bei Raumtemperatur 2 Monate haltbar.

Prüfen Verfahren

Stellen Sie vor der Messung sicher, dass die Patientenproben, Kalibratoren und Kontrollen Umgebungstemperatur (18–25 °C) haben. Mischen Sie alle Reagenzien vor der Verwendung durch vorsichtiges Umdrehen.

• Verwenden Sie nur die erforderliche Anzahl an Vertiefungen und formatieren Sie die Vertiefungen der Mikrotiterplatte für jeden Kalibrator und jede zu untersuchende Probe.

• Hinzufügen50 µLvonkalibratorenoderProbenzu jedem Brunnen.

• Hinzufügen50 µLvonEnzymkonjugatzu jedem Brunnen.

• Schütteln Sie dieMikroplattesanft für30 Sekundenmischen.

• Decken Sie die Platte mit einem Plattendeckel ab und inkubieren Sie bei37 ℃für60 Minuten.

Hinweis: Eine Inkubationstemperatur zwischen 37 und 40 °C ist akzeptabel, darf jedoch nicht unter 37 °C liegen, da sonst die Testergebnisse niedriger ausfallen!

• Entsorgen Sie den Inhalt der Mikrotiterplatte durch Dekantieren oder Absaugen. Beim Dekantieren die Platte ausklopfen und mit saugfähigem Papier trockentupfen.

• Hinzufügen350 µLvonWaschlösung, dekantieren (klopfen und abtupfen) oder absaugen. Wiederholen Sie den Vorgang insgesamt 4 weitere Male5 Wäschen. Es kann ein automatischer Mikroplatten-Streifenwascher verwendet werden. Am Ende des Waschvorgangs die Platte umdrehen und die restliche Waschlösung auf saugfähigem Papier ausklopfen.

• Hinzufügen100 µLvonSubstratzu jedem Brunnen.

• Abdeckung undInkubierenbeiUmgebungstemperatur (18–25 °C).℃)im Dunkeln für Reaktion für20Minuten. Schütteln Sie die Platte nach der Substratzugabe nicht.

• Hinzufügen50 µLvonStopplösungzu jedem Brunnen.

• Schütteln Sie15-20 Sekundenum die Flüssigkeit in den Vertiefungen zu mischen. Es ist darauf zu achten, dass die blaue Farbe vollständig in Gelb übergeht.

• Lesen Sie die Absorption jeder Vertiefung ab450 nm(unter Verwendung von 620 bis 630 nm als Referenzwellenlänge, um Well-Unvollkommenheiten zu minimieren) in einem Mikroplatten-Lesegerät. Die Ergebnisse sollten darin gelesen werden30 Minutender Zugabe der Stopplösung.

Berechnung

• Notieren Sie die vom Ausdruck des Mikroplatten-Lesegeräts erhaltene Extinktion.

• Berechnen Sie die mittlere Absorption aller Doppelmessungen und verwenden Sie den Mittelwert für die folgende Berechnung.

• Zeichnen Sie für jeden Kalibrator den dekadischen Logarithmus der Absorption gegen die Konzentration in ng/ml auf.

• Zeichnen Sie die am besten geeignete Kurve durch die aufgezeichneten Punkte auf linearem Millimeterpapier. Zur Erstellung einer Kalibrierungskurve wird die Punkt-zu-Punkt-Methode empfohlen.

Die folgenden Daten dienen nur zur Veranschaulichung und können nicht als Ersatz für die Datengenerierung zum Zeitpunkt des Tests verwendet werden.