Produktname

HDV (Hepatitis-D-Virus) Real-Time RT-PCR-Nachweissatz

Verwendungszweck

Für die in-vitro qualitative Detektion von HDV-RNA in humanem Serum oder Plasma. Konzipiert für Diagnose, Überwachung und Quantifizierung der Viruslast einer Hepatitis-D-Virus-Infektion.

Technische Parameter:

Testprinzip

• Real-Time RT-PCR: Zielt auf eine konservierte Region des HDV-Genoms (z. B. R0 oder HDAg Gen) unter Verwendung von sequenzspezifischen Primern und TaqMan-Sonden (z. B. FAM-markiert).

• Hohe Sensitivität und Spezifität: Keine Kreuzreaktivität mit HBV, HCV oder anderen Hepatitis-Viren.

• Interne Kontrolle (IC): Enthalten zur Überwachung der RNA-Extraktion und PCR-Inhibition (z. B. RNase P oder synthetische RNA-Kontrolle).

Kit-Komponenten

1. RT-PCR Master Mix: Enthält Reverse Transkriptase, Hot-Start-Taq-Polymerase, dNTPs und optimierten Puffer.

2. Primer/Sonden-Mix: HDV-spezifische Oligonukleotide mit Fluoreszenzsonde (z. B. FAM für HDV, HEX/VIC für IC).

3. Kontrollen:

   • Positivkontrolle: Synthetische HDV-RNA oder inaktiviertes Virus.

   • Negativkontrolle: Nuclease-freies Wasser.

   • Interne Kontrolle (falls enthalten).

4. Andere Reagenzien: DNase/RNase-freies Wasser, Reaktionsröhrchen (falls vorhanden).

Workflow

1. Probenvorbereitung: Virus-RNA-Extraktion (kompatibel mit QIAamp, MagMAX oder automatisierten Systemen).

2. PCR-Setup: Extrahierte RNA mit Mastermix und Primern/Sonden mischen.

3. Amplifikation:

   • Reverse Transkription: 50°C für 10–15 Min.

   • PCR-Aktivierung: 95°C für 2–5 Min.

   • Cycling: 40–45 Zyklen von 95°C (10 Sek.) → 60°C (30–60 Sek., Fluoreszenzmessung).

4. Analyse:

   • Quantitativ: Standardkurve für Viruslast (IE/ml oder Kopien/ml).

   • Qualitativ: Ct-Wert-Cut-off für positive/negative Ergebnisse.

Leistungsmerkmale

• Empfindlichkeit: ≤10–50 IE/ml (95 % LOD).

• Linearer Bereich: 10²–10⁸ IE/ml (quantitative Kits).

• Spezifität: Keine Kreuzreaktivität mit HBV, HCV, HIV oder anderen häufigen Erregern.

• Präzision: CV <5 % für Intra- und Inter-Assay-Variabilität.

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