Menschlicher Thrombomodulin TM Fetomodulin CD141 THBD THRM ELISA Kit

Menschliches thrombomodulin, TM, Fetomodulin, CD141, THBD, THRM ELISA Kit For Research Use

Menschliches thrombomodulin, TM, Fetomodulin, CD141, THBD, THRM ELISA Kit

Materialien versehen mit der Ausrüstung

Prinzip

Diese ELISA-Ausrüstung benutzt Sandwich-ELISA als die Methode. Das Microelisa-stripplate, das in dieser Ausrüstung bereitgestellt wird, ist mit einem Antikörper vorgalvanisiert worden, der zum thrombomodulin spezifisch ist. Standards oder Proben werden den passenden Microelisa-stripplate Brunnen hinzugefügt und kombinierten zum spezifischen Antikörper. Dann wird eine Meerrettich-Peroxydase (HRP) - der konjugierte Antikörper, der für thrombomodulin spezifisch ist, jedem Microelisa-stripplate gut hinzugefügt und ausgebrütet. Freie Komponenten werden weg gewaschen. Die TMB-Substratlösung wird jedem Brunnen hinzugefügt. Nur jene Brunnen, die thrombomodulin und HRP enthalten, konjugierten thrombomodulin Antikörper aussehen blau in der Farbe und sich drehen dann gelb nach der Einführung der Endlösung. Die optische Dichte (Od) wird spektralphotometrisch an einer Wellenlänge von 450 Nanometer gemessen. Der Od-Wert ist zur Konzentration von thrombomodulin proportional. Sie können die Konzentration von thrombomodulin in den Proben berechnen, indem Sie das Od der Proben mit der Standardkurve vergleichen.

Probenaufbereitung

1. Serumvorbereitung

Nach Sammlung des Vollblutes, lassen Sie das Blut gerinnen, indem Sie bei Zimmertemperatur es ungestört lassen. Dieses dauert normalerweise 10-20 Minuten. Entfernen Sie den Klumpen, indem Sie bei 2,000-3,000 U/min für 20 Minuten zentrifugieren. Wenn Niederschläg während der Reservierung erscheinen, sollte die Probe wieder centrifugated.

2. Plasmavorbereitung

Sammeln Sie das Vollblut in Rohre mit Antigerinnungsmittel (EDTA oder Zitrat). Nachdem bei Zimmertemperatur ausgebrütet für 10-20 Minuten, centrifugated Rohre für Minute 20 bei 2,000-3,000 U/min. Sammeln Sie das schwimmende sorgfältig als Plasmaproben. Wenn Niederschläg während der Reservierung erscheinen, sollte die Probe wieder centrifugated.

3. Urinproben

Sammeln Sie Urin in aseptische Rohre. Nach der Zentrifugierung für Minute 20 sammeln Sie das schwimmende sorgfältig, bei 2,000-3,000 U/min. Wenn Niederschläg während der Reservierung erscheinen, sollte die Probe wieder centrifugated. Das Vorbereitungsverfahren der Zerebrospinalflüssigkeit und der pleuroperitoneal Flüssigkeit ist das selbe wie das der Urinprobe.

4. Zellproben

Wenn Sie die Absonderungen von Zellen ermitteln möchten, sammeln Sie die Kultur, die in aseptische Rohre schwimmend ist. Nach der Zentrifugierung für Minute 20 sammeln Sie das schwimmende sorgfältig, bei 2,000-3,000 U/min. Wenn Sie intrazelluläre Komponenten ermitteln möchten, verdünnen Sie die Zellen zu 1X106/ml mit PBS (pH 7.2-7.4). Die Zellen wurden zerstört, um intrazelluläre Komponenten freizugeben durch das wiederholte Einfrieren und das Auftauen. Nach der Zentrifugierung für Minute 20 sammeln Sie das schwimmende sorgfältig, bei 2,000-3,000 U/min. Wenn Niederschläg während der Reservierung erscheinen, sollte die Probe wieder centrifugated.

5. Gewebeproben

Gewebeproben werden an -80℃ für die künftige Nutzung geschnitten, gewogen, eingefroren im flüssigen Stickstoff und gespeichert. Die Gewebeproben wurden homogenisiert, nachdem man PBS (pH 7,4) addiert hatte. Proben sollten an 4℃ bearbeitet werden. Nach der Zentrifugierung für Minute 20 sammeln Sie das schwimmende sorgfältig, bei 2,000-3,000 U/min. Aliquote das schwimmende für ELISA-Probe und -künftige Nutzung.

Anmerkungen:

• Beispielextraktion und ELISA-Probe sollten nach Beispielsammlung so bald wie möglich durchgeführt werden. Die Proben sollten entsprechend der relevanten Literatur extrahiert werden. Wenn ELISA-Probe nicht sofort durchgeführt werden kann, können Proben an -20℃.Repeated gespeichert werden, das Frieren-Tauenzyklen vermieden werden sollten.
• Unsere Ausrüstungen können nicht für Proben mit NaN3 benutzt werden, das die Tätigkeit von HRP hemmen kann.