|
Produktdetails:
|
| Zweck: | für NUR Forschungsgebrauch | Lagerung: | 2-8℃ |
|---|---|---|---|
| Spezifikation: | 48wells/96wells | Methode: | Sandwich |
| Katze. Nein.: | In-Mo1153 | Lebenslauf (%): | SD/meanX100 |
| Hervorheben: | E Cadherin Elisa Kit,Maus E Cad Elisa Kit,Forschung E Cadherin Elisa Kit |
||
Maus E-Cadherin, E-Cad ELISA Kit
Diese ELISA-Ausrüstung benutzt Sandwich-ELISA als die Methode. Das Microelisa-stripplate, das in dieser Ausrüstung bereitgestellt wird, ist mit einem Antikörper vorgalvanisiert worden, der zu E-Cad spezifisch ist. Standards oder Proben werden den passenden Microelisa-stripplate Brunnen hinzugefügt und kombinierten zum spezifischen Antikörper. Dann wird eine Meerrettich-Peroxydase (HRP) - der konjugierte Antikörper, der für E-Cad spezifisch ist, jedem Microelisa-stripplate gut hinzugefügt und ausgebrütet. Freie Komponenten werden weg gewaschen. Die TMB-Substratlösung wird jedem Brunnen hinzugefügt. Nur jene Brunnen, die E-Cad und HRP konjugierten Antikörper E-Cad enthalten, sehen in der Farbe blau aus und drehen dann sich gelb nach der Einführung der Endlösung. Die optische Dichte (Od) wird spektralphotometrisch an einer Wellenlänge von 450 Nanometer gemessen. Der Od-Wert ist zur Konzentration von E-Cad proportional. Sie können die Konzentration von E-Cad in den Proben berechnen, indem Sie das Od der Proben mit der Standardkurve vergleichen.
Materialien versehen mit der Ausrüstung
| Materialien versehen mit der Ausrüstung | 48 Bestimmungen | 96 Bestimmungen | Lagerung | |
| 1 | Benutzerhandbuch | 1 | 1 | R.T. |
| 2 | Schließungsplattenmembran | 2 | 2 | R.T. |
| 3 | Siegeltaschen | 1 | 1 | R.T. |
| 4 | Microelisa-stripplate | 1 | 1 | 2-8℃ |
| 5 | Standard: 108pg/ml | Flasche 0.5ml×1 | Flasche 0.5ml×1 | 2-8℃ |
| 6 | Standardverdünnungsmittel | Flasche 1.5ml×1 | Flasche 1.5ml×1 | 2-8℃ |
| 7 | HRP-Paronymreagens | Flasche 3ml×1 | Flasche 6ml×1 | 2-8℃ |
| 8 | Beispielverdünnungsmittel | Flasche 3ml×1 | Flasche 6ml×1 | 2-8℃ |
| 9 | Chromogen-Lösung A | Flasche 3ml×1 | Flasche 6ml×1 | 2-8℃ |
| 10 | Chromogen-Lösung B | Flasche 3ml×1 | Flasche 6ml×1 | 2-8℃ |
| 11 | Stoppen Sie Lösung | Flasche 3ml×1 | Flasche 6ml×1 | 2-8℃ |
| 12 | Wäschelösung | 20ml (20X) ×1bottle | 20ml (30X) ×1bottle | 2-8℃ |
Verfahren
Verdünnung von Standards
Brunnen 1.Ten werden für Standards in einem Microelisa-stripplate eingestellt. Gut in 1 und gut in 2 werden Standardlösung 100μl und Standardpuffer der verdünnung 50μl gut addiert und gemischt. Gut in 3 und gut in 4 werden Lösung 100μl von gut 1 und gut 2 beziehungsweise hinzugefügt. Dann werden Standardpuffer der verdünnung 50μl gut addiert und gemischt. Lösung 50μl wird von Brunnen 3 und gut 4. weggeworfen. Gut in 5 und gut in 6 werden Lösung 50μl von gut 3 und gut 4 beziehungsweise hinzugefügt. Dann werden Standardpuffer der verdünnung 50μl gut addiert und gemischt. Gut in 7 und gut in 8 werden Lösung 50μl von gut 5 und gut 6 beziehungsweise hinzugefügt. Dann werden Standardpuffer der verdünnung 50μl gut addiert und gemischt. Gut in 9 und gut in 10 werden Lösung 50μl von gut 7 und gut 8 beziehungsweise hinzugefügt. Dann werden Standardpuffer der verdünnung 50μl gut addiert und gemischt. Lösung 50μl wird von Brunnen 9 und gut 10. weggeworfen. Nach Verdünnung sind das Gesamtvolumen in allen Brunnen 50μl und die Konzentrationen sind 24ng/ml, 16 ng/ml, 8 ng/ml, 4ng/ml und 2ng/ml, beziehungsweise.
2. Im Microelisa-stripplate lassen Sie einen Brunnen leer als Leerzeichenaufbereitungssteuerung. In den Beispielbrunnen Verdünnungspuffer werden des Beispiel- 40μl und Probe 10μl addiert (Verdünnungsfaktor ist 5). Proben sollten auf die Unterseite geladen werden, ohne die wohle Wand zu berühren. Mischen Sie gut mit dem leichten Rütteln.
3. Ausbrütung: brüten Sie Minute 30 an 37℃ aus, nach versiegelt mit der Schließungsplattenmembran.
4. Verdünnung: verdünnen Sie den starken waschenden Puffer mit destilliertem Wasser (30mal für 96T und 20mal für 48T).
5. Reinigung: ziehen Sie sorgfältig weg Schließungsplattenmembran ab, saugen Sie an und füllen Sie mit der Wäschelösung wieder. Werfen Sie die Wäschelösung weg, nachdem Sie für 30 Sekunden stillgestanden sind. Wiederholen Sie das Waschenverfahren für 5mal.
6. Fügen Sie 50 μl HRP-Paronymreagens jedem Brunnen ausgenommen die Leerzeichenaufbereitungssteuerung gut hinzu.
7. Ausbrütung, wie in Schritt 3. beschrieben.
8. Reinigung, wie in Schritt 5. beschrieben.
9. Farbton: Fügen Sie 50 μl Chromogen-Lösung A und 50 μl Chromogen-Lösung B jedem Brunnen, Mischung mit leicht rütteln hinzu und brüten Sie an 37℃ für 15 Minuten aus. Vermeiden Sie bitte Licht während des Farbtons.
10. Beendigung: addieren Sie 50, die μl Lösung zu jedem Brunnen stoppen, um die Reaktion zu beenden. Die Farbe im Brunnen sollte vom Blau ändern, um sich gelb zu färben.
11. Gelesene Absorption O.D. an 450nm unter Verwendung eines Mikrotiter-Platten-Lesers. Der Od-Wert der Leerzeichenaufbereitungssteuerung gut wird als null eingestellt. Probe sollte innerhalb 15 Minuten durchgeführt werden, nachdem man hinzugefügt hat, stoppen Lösung.
Präzision
Intra-Probe Präzision (Präzision innerhalb einer Probe): 3 Proben mit niedrigem, mittlerem und hochrangigem E-Cad wurden 20mal auf einer Platte, beziehungsweise geprüft.
Inter-Probe Präzision (Präzision zwischen Proben): 3 Proben mit niedrigem, mittlerem und hochrangigem E-Cad wurden auf 3 verschiedenen Platten, 8 Verdoppelungen in jeder Platte geprüft.
Lebenslauf (%) = SD/meanX100
Intra-Probe: Lebenslauf<10>
Inter-Probe: Lebenslauf<12>
Probenstrecke
0.6pg/ml -80pg/ml
Empfindlichkeit:
0,1 pg/ml
Ansprechpartner: Mr. Steven
Telefon: +8618600464506
