Des Elisa LH-Test-Streifen-ISO13485 PC Luteinisierungshormon-Test-der Ausrüstungs-96

LH Elisa Kit Luteinizing Hormone

1. Beabsichtigter Gebrauch

Immunoassay für die quantitative in-vitrobestimmung des Luteinisierungshormons im menschlichen Serum.

2. Zusammenfassung

• LH (Luteinisierungshormon), zusammen mit FSH (Follikelstimulierungshormon), gehört der Gonadotropin-Familie. LH und FSH regulieren sich und das Wachstum und die Funktion der Gonaden synergistisch anzuregen (Eierstöcke und Testikel). Wie FSH ist TSH und hCG, LH ein Glucoproteid, das aus zwei Untereinheiten besteht (α- und Βketten). (1, 2, 3) dieses proteohormone, das 121 Aminosäuren und aus drei Zuckerketten besteht, hat ein Molekulargewicht von 29500 daltons. In den Frauen fungieren die Gonadotropins innerhalb des stabilisierten Stromkreises des Hypothalamus-pituitäreierstocks, um den Menstruationszyklus zu steuern.
• LH und FSH werden in den Impulsen von den gonadotropic Zellen des Hypophysenvorderlappens und des Durchlaufs über den Blutstrom zu den Eierstöcken freigegeben. Hier regen die Gonadotropins das Wachstum und die Reifung des Follikels und folglich der Biosynthese der Östrogene und der Progesterone an. Die höchsten LH-Konzentrationen treten während der Mittelzyklusspitze auf und verursachen Ovulation und Bildung des Corpus luteum, deren Hauptabsonderungsprodukt Progesteron ist. In den Leydig-Zellen der Testikel, regt LH die Produktion des Testosterons an. Bestimmung der LH-Konzentration wird in der Erklärung von Funktionsstörungen innerhalb des Hypothalamus-pituitärgonadesystems verwendet. Die Bestimmung von LH in Verbindung mit FSH wird für die folgenden Anzeichen verwendet: angeborene Krankheiten mit Chromosomenaberrationen (z.B. Turner-Syndrom), den polycystic Eierstöcken (PCO), die Ursachen der Amenorrhö, Wechseljahressyndrom und vermutete Leydig-Zellunzulänglichkeit erklärend. (1, 4, 5)

3. Messgrundlage

Sandwichprinzip. Gesamtdauer der Probe: 80 Minuten.

• Probe, Anti-LH beschichtete microwells und Enzym beschriftete Anti-LH werden kombiniert.

• Während der Ausbrütung stellt sich LH in der Probe wird gewährt zu reagieren dar

gleichzeitig mit den zwei Antikörpern, mit dem Ergebnis der LH-Moleküle, die sind

eingeschoben zwischen dem festen Aggregatzustand und den Enzym-verbundenen Antikörpern.

• Nach Reinigung wird ein Komplex zwischen dem festen Aggregatzustand, der LH innerhalb der Probe und den Enzym-verbundenen Antikörpern durch immunologische Reaktionen erzeugt.

• Substratlösung wird dann durch diesen Komplex, mit dem Ergebnis einer chromogenen Reaktion hinzugefügt und katalysiert. Die resultierende chromogene Reaktion wird als Absorption gemessen.

• Die Absorption ist zur Menge von LH in der Probe proportional.

Reagenzien

Materialien bereitgestellt

• Beschichteter Microplate, 8 X12 Streifen, 96 Brunnen, vorgalvanisiert mit der Maus monoclonal

Anti-LH.

• Kalibrierer, 6 Phiolen, 1 ml jedes, gebrauchsfertig; Konzentrationen: 0 (A), 5 (B), 20 (C), 50 (D), 100 (E) und 200 (F) mIU/mL.

• Enzym-Paronym, 1 Phiole, 11 ml HRP (Meerrettichperoxydase) beschriftete Maus monoclonal Anti-LH im Puffer Tris-NaCl, der BSA enthält (Rinderserumalbumin). Enthält 0,1% Konservierungsmittel ProClin300.

• Substrat, 1 Phiole, 11ml, gebrauchsfertig, (tetramethylbenzidine) TMB.

• Stoppen Sie Lösung, 1 Phiole, 6,0 ml von 1 mol/L Schwefelsäure.

• Wäsche-Lösungs-Konzentrat, 1 Phiole, 25 ml (40X konzentrierte sich), PBS-Tween

Wäschelösung.

• IFU, 1 Kopie.

• Platten-Deckel: 1-teilig.

Materialien erfordert (aber nicht zur Verfügung gestellt)

• Microplate-Leser mit saugfähiger Fähigkeit der Wellenlänge 450nm und 620nm.

• Microplate-Waschmaschine.

• Brutkasten

4. Testverfahren

• Verwenden Sie nur die Anzahl von den erforderten Brunnen und formatieren Sie die Brunnen der microplates für

jeder geprüft zu werden Kalibrierer und Probe.

• Fügen Sie μL 25 von Kalibrierern oder von Proben jedem Brunnen hinzu.

• Fügen Sie μL 100 des Enzymparonyms jedem Brunnen hinzu.

• Rütteln Sie das microplate leicht, damit 30 Sekunden mischen.

• Bedecken Sie die Platte mit einem Plattendeckel und brüten Sie bei °C 37 für 60 Minuten aus.

• Werfen Sie den Inhalt der Mikroplatte durch Abschlämmung oder Aspiration weg. Wenn

abfüllend, klopfen Sie und beflecken Sie das Plattentrockene mit saugfähigem Papier.

• Fügen Sie μL 350 der Wäschelösung hinzu, füllen Sie ab (Hahn und Fleck) oder saugen Sie an. Wiederholen Sie 4 zusätzliche Mal für insgesamt 5 Wäschen. Eine automatisierte microplate Streifenwaschmaschine kann benutzt werden. Am Ende der Reinigung, wandeln Sie die Platte um und klopfen Sie heraus jede Restwäschelösung auf saugfähiges Papier.

• Fügen Sie μL 100 des Substrates jedem Brunnen hinzu.

• Brüten Sie bei Raumtemperatur (18-25℃) in der Dunkelheit für Reaktion für 20 Minuten aus. Rütteln Sie die Platte nicht nach Teilstaatzusatz.

• Fügen Sie μl 50 der Endlösung jedem Brunnen hinzu.

• Rütteln Sie, damit 15-20 Sekunden die Flüssigkeit innerhalb der Brunnen mischen. Es ist zu wichtig

garantieren Sie dass die blauen Farbänderungen, um sich vollständig gelb zu färben.

• Lesen Sie die Absorption jedes Brunnens bei 450 Nanometer (unter Verwendung 620 bis 630 Nanometer als

Referenzwellenlänge, zum von wohlen Unvollkommenheiten) in einem Mikroplattenleser herabzusetzen.