Untereinheit Alpha Mouse IL2R CD25 IL2-RA ELISA Kit des Empfänger-Interleukin-2

Empfänger-Untereinheitsalpha der Maus Interleukin-2; IL2R; CD25; IL2-RA ELISA Ausrüstung

Materialien versehen mit der Ausrüstung

Exemplaranforderungen

• Serumgerinnung bei Zimmertemperatur 10-20 Minuten, Minute der Zentrifugierung 20 mit der Geschwindigkeit von U/min 2000-3000 entfernen schwimmendes, wenn Niederschlag erschien, Trommel der Zentrifuge wieder.
• Plasmagebrauch entsprach EDTA oder zitriert Plasma als Antigerinnungsmittel, Mischung 10-20 Minuten, Zentrifugierung 20, die Minute mit der Geschwindigkeit von U/min 2000-3000 schwimmendes entfernen, wenn Niederschlag erschien, Trommel der Zentrifuge wieder.
• Urin-sammeln Sie, einen sterilen Behälter, Zentrifugierung 20 zu klagen, die Minute mit der Geschwindigkeit von U/min 2000-3000 schwimmendes entfernen, wenn Niederschlag erschien, Trommel der Zentrifuge wieder. Die Operation des Hydrothorax-und Zerebrospinalflüssigkeit Hinweises auf ihr.
• Zellkultur, ausscheidende Komponenten schwimmend-zu ermitteln, zu sammeln klagen einen sterilen Behälter, Zentrifugierung 20, die Minute mit der Geschwindigkeit von U/min 2000-3000 schwimmendes entfernen, ermitteln die Zusammensetzung von Zellen, Dilut-Zellsuspendierung mit PBS (PH7.2-7.4), Zellkonzentration erreichte 1 Million/ml, wiederholte Frieren-Tauenzyklen, Schadenzellen und Freigabe von intrazellulären Komponenten, Minute der Zentrifugierung 20 mit der Geschwindigkeit von U/min 2000-3000 entfernen schwimmendes, wenn Niederschlag erschien, Trommel der Zentrifuge wieder.
• Gewebeproben, nach dem Schnitt von Proben, überprüfen das Gewicht, addieren PBS (PH7.2-7.4), schnell eingefroren mit flüssigem Stickstoff, instandhalten Proben an 2-8℃, nachdem sie geschmolzen sind, addieren PBS (PH7.4), eigenhändig homogenisiert, oder Schleifer, Minute der Zentrifugierung 20 mit der Geschwindigkeit von U/min 2000-3000 entfernen schwimmendes.
• extrahieren Sie so bald wie möglich nach Exemplarsammlung und entsprechend der relevanten Literatur und sollte Experiment nach der Extraktion so bald wie möglich sein. Wenn sie nicht kann, kann Exemplar in ℃ -20 gehalten werden, um zu konservieren, Avoid wiederholte Frieren-Tauenzyklen.
• Kann die Probe nicht ermitteln, die NaN3 enthalten, weil NaN3 aktives HRP hemmt.

Prinzip

Diese ELISA-Ausrüstung benutzt Sandwich-ELISA als die Methode. Das Microelisa-stripplate, das in dieser Ausrüstung bereitgestellt wird, ist mit einem Antikörper vorgalvanisiert worden, der zu IL2R spezifisch ist. Standards oder Proben werden den passenden Microelisa-stripplate Brunnen hinzugefügt und kombinierten zum spezifischen Antikörper. Dann wird eine Meerrettich-Peroxydase (HRP) - der konjugierte Antikörper, der für IL2R spezifisch ist, jedem Microelisa-stripplate gut hinzugefügt und ausgebrütet. Freie Komponenten werden weg gewaschen. Die TMB-Substratlösung wird jedem Brunnen hinzugefügt. Nur jene Brunnen, die IL2R und HRP enthalten, konjugierten thrombomodulin Antikörper aussehen blau in der Farbe und sich drehen dann gelb nach der Einführung der Endlösung. Die optische Dichte (Od) wird spektralphotometrisch an einer Wellenlänge von 450 Nanometer gemessen. Der Od-Wert ist zur Konzentration von IL2R proportional. Sie können die Konzentration von IL2R in den Proben berechnen, indem Sie das Od der Proben mit der Standardkurve vergleichen.

Anmerkungen:

• Speichern Sie die Ausrüstung an 4°C nach dem Empfang. Die Ausrüstung sollte zur Raumtemperatur vor der Probe abgeglichen werden. Entfernen Sie alle nicht benötigten Streifen von Antikörper-überzogener Platte IL2R, versiegeln Sie sie Folie in der mit Reißverschluss wieder und halten Sie an 4°C.
• Niederschläg erscheinen möglicherweise in starkem waschendem Puffer. Erhitzen Sie bitte den Puffer, um alle Niederschläg aufzulösen, die nicht die Ergebnisse beeinflussen.
• Genaue Pipette sollte benutzt werden, um experimentellen Fehler zu vermeiden. Proben sollten dem Microplate in weniger als 5 Minuten hinzugefügt werden. Wenn viele Proben eingeschlossen sind, wird Pipette des mehrfachen Kanals empfohlen.
• Standardkurve sollte in jeder Probe eingeschlossen sein. Zurückgebogene Brunnen werden empfohlen. Wenn der Od-Wert der Probe größer als der erste Brunnen von Standards ist, verdünnen Sie bitte die Probe (n-Zeiten) vor Test. Wenn Sie die ursprüngliche thrombomodulin Konzentration berechnen, multiplizieren Sie bitte den Gesamtverdünnungsfaktor (XnX5).
• Zwecks Kreuz-Kontamination vermeiden, sollen Microplate-Eichmeister für nur einmaligen Gebrauch.
• Halten Sie bitte Substrat weg von Licht.
• Die ganze Operation sollte Übereinstimmung mit den Anweisungen des Herstellers ausschließlich sein. Die Ergebnisse bestimmt vom Mikrotiter-Platten-Leser.
• Alle Proben, waschende Puffer und Abfälle sollten als Infektionserreger behandelt werden.
• Reagenzien von den verschiedenen Losen sollten nicht gemischt werden.