Mause-Test-Kit Mouse Interferon Gamma Sandwich-Methode Ifn-Gamma-RUO

Mäuseinterferon γ; Interferongamma; IFN-γ; IFN-Gamma; IFNG; ELISA Kit

Für die quantitative in-vitrobestimmung von Interferon γ (IFN-γ) Konzentrationen im Mäuseserum, im Plasma, in den Kulturmedien oder in irgendeiner biologischen Flüssigkeit.

Prinzip

Diese ELISA-Ausrüstung benutzt Sandwich-ELISA als die Methode. Das Microelisa-stripplate, das in dieser Ausrüstung bereitgestellt wird, ist mit einem Antikörper vorgalvanisiert worden, der zu IFN-γ spezifisch ist. Standards oder Proben werden den passenden Microelisa-stripplate Brunnen hinzugefügt und kombinierten zum spezifischen Antikörper. Dann wird eine Meerrettich-Peroxydase (HRP) - der konjugierte Antikörper, der für IFN-γ spezifisch ist, jedem Microelisa-stripplate gut hinzugefügt und ausgebrütet. Freie Komponenten werden weg gewaschen. Die TMB-Substratlösung wird jedem Brunnen hinzugefügt. Nur jene Brunnen, die IFN-γ und HRP konjugierten IFN-γantikörper enthalten, sehen in der Farbe blau aus und drehen dann sich gelb nach der Einführung der Endlösung. Die optische Dichte (Od) wird spektralphotometrisch an einer Wellenlänge von 450 Nanometer gemessen. Der Od-Wert ist zur Konzentration von IFN-γ proportional. Sie können die Konzentration von IFN-γ in den Proben berechnen, indem Sie das Od der Proben mit der Standardkurve vergleichen.

Materialien versehen mit der Ausrüstung

• Verdünnung von Standards

Zehn Brunnen werden für Standards in einem Microelisa-stripplate eingestellt. Gut in 1 und gut in 2 werden Standardlösung 100μl und Standardpuffer der verdünnung 50μl gut addiert und gemischt. Gut in 3 und gut in 4 werden Lösung 100μl von gut 1 und gut 2 beziehungsweise hinzugefügt. Dann werden Standardpuffer der verdünnung 50μl gut addiert und gemischt. Lösung 50μl wird von Brunnen 3 und gut 4. weggeworfen. Gut in 5 und gut in 6 werden Lösung 50μl von gut 3 und gut 4 beziehungsweise hinzugefügt. Dann werden Standardpuffer der verdünnung 50μl gut addiert und gemischt. Gut in 7 und gut in 8 werden Lösung 50μl von gut 5 und gut 6 beziehungsweise hinzugefügt. Dann werden Standardpuffer der verdünnung 50μl gut addiert und gemischt. Gut in 9 und gut in 10 werden Lösung 50μl von gut 7 und gut 8 beziehungsweise hinzugefügt. Dann werden Standardpuffer der verdünnung 50μl gut addiert und gemischt. Lösung 50μl wird von Brunnen 9 und gut 10. weggeworfen. Nach Verdünnung sind das Gesamtvolumen in allen Brunnen 50μl und die Konzentrationen sind 180 pg/ml, 120pg/ml, 60 pg/ml, 30pg/ml und 15 pg/ml, beziehungsweise.

Berechnung von Ergebnissen

Bekannte Konzentrationen von Maus-IFN-γstandard und von seinem entsprechenden Lesungs-Od wird auf der Klotzskala (Xachse) und der Klotzskala (Yachse) beziehungsweise grafisch dargestellt. Die Konzentration der Maus IFN-γ in der Probe wird durch grafische Darstellung das O.D. des Beispiel auf der Y-Achse bestimmt. Die Ausgangskonzentration wird berechnet, indem man den Verdünnungsfaktor multipliziert.

Präzision

Intra-Probe Präzision (Präzision innerhalb einer Probe): 3 Proben mit niedriger, mittlerer und hochrangiger Maus IFN-γ wurden 20mal auf einer Platte, beziehungsweise geprüft.

Inter-Probe Präzision (Präzision zwischen Proben): 3 Proben mit niedriger, mittlerer und hochrangiger Maus IFN-γ wurden auf 3 verschiedenen Platten, 8 Verdoppelungen in jeder Platte geprüft.

Lebenslauf (%) = SD/meanX100

Intra-Probe: Lebenslauf<10>

Inter-Probe: Lebenslauf<12>

Probenstrecke

3pg/ml-200 pg/ml

Empfindlichkeit:

0.8pg/ml