Humaner TNF-α Elisa-Test-Kit

Beabsichtigte Verwendung

Dieses Kit dient zur Bestimmung von TNF-α-Konzentrationen in menschlichen Zellkulturen.

Prüfverfahren

1- Verdünnen und Probe hinzufügen: Verdünnen Ursprungsdichte 400ng/L 5 Standard 150μl Original density Standard+150μl Standard diluent 200ng/L 4 Standard 150μl 5 Standard+150μl Standard diluent 100ng/L 3 Standard 150μl 4 Standard+150μl Standard diluent 50ng/L 2 Standard 150μl 3 Standard +150μl Standard diluent 25ng/L 1 Standard 150μl 2 Standard +150μl Standard diluent

2.Probe hinzufügen:Blankwellen separat einstellen (Blank-Vergleichswellen fügen keine Probe und HRP-Konjugat-Reagenz hinzu, sonst ist jeder Schritt derselbe).50 μl Standard auf Microelisa-Stripplatte zugebenDie Probe wird mit einer Verwässerung von 40 μl auf die Prüfprobe gesetzt, dann wird die Prüfprobe mit 10 μl (die endgültige Verdünnung der Probe beträgt 5 mal) gesetzt, die Probe auf die Prüfprobe gesetzt, so weit wie möglich nicht an die Wand gerührt und vorsichtig gemischt.

3.Inkubation: Nach dem Verschluss der Platte mit der Verschlussplattenmembran, 30 min bei 37°C.

4.Flüssigkeit konfigurieren: 30- (oder 20-fache) Waschlösung, 30- (oder 20-fache) mit Destidiertwasser und Reserve verdünnt.

5Waschen: Entdecken Sie die Schließplattenmembran, entsorgen Sie die Flüssigkeit, trocknen Sie sie mit einem Schwung, fügen Sie Waschpuffer zu jedem Schlauch hinzu, halten Sie 30 Sekunden, dann entleeren Sie, wiederholen Sie 5 Mal, trocknen Sie sie mit einem Schlag.

6.Enzym hinzufügen: Jeder Welle, ausgenommen die leere Welle, wird 50 μl HRP-Conjugate-Reagenz zugesetzt.

7.Inkubation: Operation mit 3.

8.Waschen:Betrieb mit 5.

9.farbe:Zusetzen Sie Chromogenlösung A 50ul und Chromogenlösung B 50ul zu jeder Welle, lassen Sie die Lichtkonservierung 10 Minuten lang bei 37°C vermeiden

10.Stoppen der Reaktion:Zusetzen Sie Stop-Lösung50μl zu jedem Wel, Stoppen Sie die Reaktion ((die blaue Farbe ändert sich in gelbe Farbe).

11.Analyse: Entnehmen Sie einen Blindwert von 0, Absorptionsgrad bei 450 nm nach Zugabe der Stopplösung und innerhalb von 15 min.

Musteranforderungen

1. so bald wie möglich nach der Probenentnahme und gemäß der einschlägigen Literatur zu extrahieren und so bald wie möglich nach der Extraktion zu experimentieren.1 Exemplar kann bei 20 °C aufbewahrt werden, umVermeiden Sie wiederholte Gefrier-Tonzyklen.

2Die Proben, die NaN3 enthalten, können nicht nachgewiesen werden, da NaN3 die HRP-Aktivität hemmt.

Wichtige Anmerkungen

1. Das Kit aus dem Kühlraum entnommen, sollte 15-30 Minuten in Raumtemperatur ausbalanciert werden, ELISA-Platten beschichtet, wenn nach dem Öffnen nicht aufgebraucht,Die Platte sollte in einem versiegelten Beutel aufbewahrt werden..

2. Waschpuffer wird zur Kristallisation getrennt, es kann erhitzt werden, das Wasser hilft, sich zu lösen, wenn verdünnt. Waschen beeinflusst nicht das Ergebnis.

3. die Probe mit dem Probemesser hinzufügen Jeder Schritt, und korrigieren Sie seine Genauigkeit häufig, vermeidet den experimentellen Fehler.

4. wenn der Teststoffgehalt übermäßig hoch ist (Die Proben-OD ist größer als die erste Standardgröße), bitte die Probe (n-fache) verdünnen, bitte verdünnen und mit dem Verdünnungsfaktor multiplizieren.(×n×5).

5Die Schließplattenmembran beschränkt nur die Einwegverwendung, um eine Kreuzkontamination zu vermeiden.

6Das Substrat entzieht sich der Lichtkonservierung.

7Bitte beachten Sie die Gebrauchsanweisung streng. Bei der Bestimmung des Testergebnisses muss der Mikrotiter-Tellerleser als Standard verwendet werden.

8. Alle Proben, Waschpuffer und jede Art von Abfall sollten entsprechend dem Infektionsmaterialprozess.

9- Mischen Sie die Reagenzien nicht mit denen aus anderen Partien.