Zweck:
Dieses Kit ermöglicht die Bestimmung der freien Hämkonzentrationen im Vollblut.
Prinzip des Tests
Das Kit untersucht das Niveau von freiem menschlichem Häm in der Probe, verwendet reinigtes menschliches freies Häm-Antikörper, um die Mikrotiterplatten zu beschichten, macht Festphasen-Antikörper und fügt dann freies Häm zu den Brunnen hinzu,Kombinierter freier Häm-Antikörper mit HRP-Kennzeichnung, werden Antikörper-Antigen-Enzym-Antikörper-Komplex, nach dem Waschen vollständig, Hinzufügen TMB Substratlösung, TMB Substrat wird blau bei HRP enzymkatalysiert,Die Reaktion wird durch Zugabe einer Schwefelsäure-Lösung beendet und die Farbveränderung wird spektrophotometrisch mit einer Wellenlänge von 450 nm gemessen.Die Konzentration des freien Humane Hems in den Proben wird dann durch Vergleich der O.D. der Proben mit der Standardkurve bestimmt.
Technische Parameter:
| Produktbezeichnung: |
Human Free Heme RUO ELISA-Testsatz |
| Herkunftsland: |
China |
| Musterart: |
Serum, Plasma |
| Das Exemplar: |
Serum 50 μl |
| Speichertemperatur: |
2-8°C |
| Haltbarkeit: |
6 Monate |
| Empfindlichkeit: |
Hoch |
| Zeit der Prüfung: |
1 Stunde |
| Größe des Kits: |
96 Prüfungen |
| Anwendungen: |
Medizinische Diagnose |
Material, das mit dem Kit geliefert wird:
| 1 |
Waschlösung |
20 ml × 1 Flasche |
7 |
Stoppen der Lösung |
6 ml × 1 Flasche |
| 2 |
HRP-Konjugatreagenz |
6 ml × 1 Flasche |
8 |
Standard ((4 μg/ml) |
0.5 ml × 1 Flasche |
| 3 |
Microelisa-Stripplatte |
12 gut × 8 Streifen |
9 |
Standardverdünnungsmittel |
1.5 ml × 1 Flasche |
| 4 |
Probenverdünnungsmittel |
6 ml × 1 Flasche |
10 |
Anweisungen |
1 |
| 5 |
Chromogenlösung A |
6 ml × 1 Flasche |
11 |
Schließplattenmembran |
2 |
| 6 |
Chromogenlösung B |
6 ml × 1 Flasche |
12 |
Versiegelte Säcke |
1 |
Musteranforderungen
- Die Proben sollten so bald wie möglich nach der Sammlung und gemäß der einschlägigen Literatur extrahiert und so bald wie möglich nach der Extraktion experimentiert werden.Das Exemplar kann bei -20 °C aufbewahrt werden, umVermeiden Sie wiederholte Gefrier-Tonzyklen.
- Die Proben, die NaN3 enthalten, können nicht nachgewiesen werden, da NaN3 die HRP-Aktivität hemmt.
Prüfverfahren
- Verdünnen und Probe hinzufügen: Verdünnen Ursprungsdichte Norm wie in der folgenden Tabelle:
| 2 μg/ml |
5 Norm |
150 μl ursprüngliche Dichte Standard+150 μl Standardverdünnungsmittel |
| 1 μg/ml |
4 Norm |
150 μl 5 Standard+150 μl Standardverdünner |
| 0.5 μg/ml |
3 Norm |
150 μl 4 Standard+150 μl Standardverdünner |
| 00,25 μg/ml |
2 Norm |
150 μl 3 Standard + 150 μl Standardverdünner |
| 0.125 μg/ml |
1 Norm |
150 μl 2 Standard + 150 μl Standardverdünner |
2.Probe hinzufügen:Blanke Bohrungen separat einstellen (Blanke Vergleichsbohrungen fügen keine Probe und HRP-Conjugate-Reagenz hinzu, sonst ist jeder Schritt derselbe).50 μl Standard auf Microelisa-Stripplatte zugeben,die Probenverwässerung 40μl in die Probenbrunnen hinzufügen, anschließend die Probenbrunnen mit 10μl (die Endverwässerung der Proben beträgt 5-fache) hinzufügen, die Proben in die Brunnen geben, die Brunnenwand so weit wie möglich nicht berühren und vorsichtig mischen.
3.Inkubation: Nach dem Verschluss der Platte mit der Verschlussplattenmembran, 30 min bei 37°C.
4.Flüssigkeit konfigurieren: 30- (oder 20-fache) Waschlösung, 30- (oder 20-fache) mit destilliertem Wasser und Reserve verdünnt.
5.Wäsche: Entdecken Sie die Schließplattenmembran, entsorgen Sie die Flüssigkeit, trocknen Sie sie mit einem Schwung, fügen Sie jedem Brunnen Waschpuffer hinzu, halten Sie 30 Sekunden, dann entleeren Sie, wiederholen Sie 5 Mal, trocknen Sie mit einem Klopfen.
6.Enzym hinzufügen:HRP-Conjugate-Reagenz 50μl in jede Brunnenstelle, ausgenommen die leere Brunnenstelle, hinzufügen.
7.Inkubation: Operation mit 3.
8.Waschen:Betrieb mit 5.
9.farbe:Zusetzen Sie Chromogenlösung A 50ul und Chromogenlösung B 50ul zu jedem Brunnen, lassen Sie die Lichtkonservierung 10 Minuten lang bei 37°C vermeiden
10.Stoppen der Reaktion:Geben Sie jeder Brunne Stop-Lösung50μl hinzu, Stoppen Sie die Reaktion ((die blaue Farbe verändert sich in gelbe Farbe).
11.Analyse: Entnehmen Sie die leere Bohrung bei Null, Absorptionsmenge bei 450 nm nach Zugabe der Stopplösung und innerhalb von 15 min.
Berechnen
Nehmen wir die Standarddichte als die horizontale, den OD-Wert für die vertikale, zeichnen wir die Standardkurve auf Grafikpapier,Finden Sie die entsprechende Dichte nach dem OD-Wert der Stichprobe durch die Stichprobenkurve, multipliziert mit dem Verdünnungsmultiplikator oder berechnet die gerade Regressionsgleichung der Standardkurve mit der Standarddichte und dem OD-Wert,mit dem Stichproben-OD-Wert in der Gleichung,Berechnung der Probendichte, multipliziert mit dem Verdünnungsfaktor, ergibt sich die tatsächliche Probendichte.
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