EBV-VCA IgA Ab Test ELISA Kit Enzyme Immunoassay Test Plasma Exemplar

EBV-VCA IgA Ab ELISA Kit Catalog No.: BE501A
Enzym Immunoassay für die Entdeckung von IgA-Antikörper zum Viren-capsid Antigen (VCA) von Epstein-Barrvirus (EBV).
 
1. PRINZIP DER PROBE
Das EBV-VCA IgA Ab ELISA Kit verwendet ein Erfassungssystem, in dem microplate Brunnen mit recombinant Antigen entsprechend einem in hohem Grade Antigensegment EBV-VCA beschichtet werden. Serum- oder Plasmaexemplare, Kontrollen werden den Brunnen hinzugefügt. Während der Ausbrütung binden IgA-Antikörper, die für EBV-VCA Geschenk im Exemplar spezifisch sind, an das recombinant Antigen, das auf die microplate Brunnen geregelt wird. Die Brunnen werden gewaschen, um ungebundene Materialien zu entfernen, und anti-menschliches IgA-Peroxidase-Konjugat bindet an den Antigenantikörperkomplex und überschüssige ungebundene Enzymparonyme werden wieder durch das Waschen entfernt. Das Enzym-Substrat, tetramethylbenzidine (TMB), wird nach Ausbrütung hinzugefügt, die das Substrat durch das verklemmte Enzym hydrolysiert wird und eine blaue oder blaugrüne Farbe entwickelt sich in den Brunnen, die EBV-VCA IgA Antikörper enthalten. Der Enzymreaktion wird der Zusatz der Schwefelsäure kurz aufgehalten bei. Die Intensität der Farbe entwickelt wird spektralphotometrisch an 450nm (450 nm/630 Nanometer) gelesen und ist zur Menge von den Antikörpern proportional, die im Exemplar vorhanden sind.
REAGENZIEN
 
2. Materialien versehen mit den Ausrüstungen:

 
3. PROBIERVERFAHREN

1. Holen Sie ELISA Kit (alle Reagenzien) und Exemplare zur Raumtemperatur vor Gebrauch (ungefähr 30 Minuten).
2. Dilute starkes Wäschepuffer1:19 mit ddH2O. Zum Beispiel sollten 5 ml des Wäschepufferkonzentrates zu einem Gesamtvolumen von 100 ml mit entionisiert worden verdünnt werden oder destilliertes Wasser.
3. Für jeden Test, leeres des Satzes einer gut als Hintergrundsteuerung, zwei positive und drei negative Kontrollen. Führen Sie positive Steuerung 100ml und negatives Steuerduplikat in einzelne Brunnen zu. Weder sollten Proben noch HRP-Paronym in den freien Raum gut hinzugefügt werden.
4. Führen Sie 100ml der Beispielverdünnung in Brunnen des einzelnen Tests ausgenommen die Kontrollen zu.
5. Fügen Sie 10ml jedes Prüflings in die Testbrunnen hinzu; Turbulenz zu mischen.
6. Brüten Sie für 30 Minuten an 37°C aus
7. Waschen Sie jedes gut 5mal, indem Sie kräftig jeden Brunnen mit verdünntem Wäschepuffer füllen, dann die Platte, um alles Wasser heraus zu erhalten umwandeln und die Kante von Brunnen auf saugfähigem Papier für einige Sekunden blockieren.
8. Fügen Sie 100ml des Enzym-Paronyms jedem Brunnen hinzu. Mischen Sie ihn leicht, indem Sie die Mikrotiterplatte auf flacher Bank für Minuten 1 wirbeln. Fügen Sie Enzym-Paronym nicht dem freien Raum gut hinzu.
9. Brüten Sie für 20 Minuten an 37°C aus
10. Waschen Sie die Platte 5mal als Schritt 7.
11. Fügen Sie einen Rückgang (50ml) von Substrat-Lösung A (HRP-Substrat) jedem Brunnen hinzu, dann fügen Sie einen Rückgang (50ml) von Substrat-Lösung B (TMB) jedem Brunnen hinzu. Mischen Sie leicht und brüten Sie an 37°C für 30 Minuten. aus.
12. Fügen Sie einen Tropfen (50ml) der Endlösung jedem Brunnen hinzu, um die Farbreaktion zu stoppen. Lesen Sie den Od-Wert bei 450 nm/630 Nanometer mit Doppelfilterplattenleser. Es ist die Wahl, zum des Od-Wertes bei 450 Nanometer mit einzelnem Filterplattenleser zu lesen. (unter Verwendung des Od-Wertes des leeren Brunnens, zum der ganzer Od-Lesung von allen Brunnen zu korrigieren)