Thyrotropin TSH ELISA TEST Schilddrüsen-Stimulierungshormon-Test

Heiße Verkauf TSH ELISA TEST-AUSRÜSTUNG
Hinweis: Tests DS177701 96

Beabsichtigter Gebrauch
Immunoassay für die quantitative in-vitrobestimmung von Thyrotropin im menschlichen Serum.

1. Zusammenfassung

• Schilddrüse-anregendes Hormon (TSH, Thyrotropin) ist ein Glucoproteid, das ein Molekulargewicht von ca. 30000 daltons hat und aus zwei Untereinheiten besteht.
• Maß des Serumkonzentration oftmals Thyrotropin (TSH), des Glucoproteids mit einem Molekulargewicht von 28.000 daltons und vom Hypophysenvorderlappen abgesondert, wird im Allgemeinen als der empfindlichste Indikator angesehen, der für die Diagnose der Primär- und Sekundär verfügbar ist (pituitären) Hypothyreose (1,2).
• TSH-Maße sind gleichmäßig nützlich, wenn man Sekundär- und tertiäre (hypothalamische) Hypothyreose von der Primärschilddrüsenerkrankung unterscheidet. TSH-Freigabe vom pituitären wird durch freigebenden Faktor des Thyrotropin (TRH), das durch den Hypothalamus abgesondert wird, und durch direkte Aktion von T4 und von Triiodothyronine (T3), die Schilddrüsenhormone, am pituitären reguliert.
• Zunahmeniveaus von T3 und von T4 verringert die Antwort vom pituitären auf den stimulierenden Effekten von TRH. In der Sekundär- und tertiären Hypothyreose sind Konzentrationen von T4 normalerweise niedrig und TSH-Niveaus sind im Allgemeinen niedrig oder normal. Entweder pituitärer TSH-Mangel (Sekundärhypothyreose) oder Unzulänglichkeit der Anregung vom pituitären durch TRH (tertiäre Hypothyreose) verursacht dieses.
• Der TRH-Anregungstest unterscheidet diese Bedingungen. In der Sekundärhypothyreose wird TSH-Antwort zu TRH abgestumpft, während eine normale oder verzögerte Antwort in der tertiären Hypothyreose erhalten wird. Weiter hat die Einführung von immunoenzymometric Proben das Labor mit genügender Empfindlichkeit versehen, um dem Unterscheiden von Hyperthyreose von der euthyroid Bevölkerung und der Erweiterung der Nützlichkeit von TSH-Maßen zu ermöglichen. Diese Methode ist eine Probe der zweiten Generation, die die Durchschnitte für Unterscheidung in der hyperthyroid-euthyroid Strecke zur Verfügung stellen. (3)

2. Reagens-Materialien stellten zur Verfügung
• Beschichteter Microplate, 8 X12 Streifen, 96 Brunnen, vorgalvanisiert mit Mausmonoclonal anti--TSH.
• Kalibrierer, 6 Phiolen, 1 ml jedes, gebrauchsfertig; Konzentrationen: 0 (A), 0,5 (B), 2 (C), 5 (D), 10 (E) und 25 (F) μIU/mL.
• Enzym-Paronym, 1 Phiole, 6,0 ml HRP (Meerrettichperoxydase) beschriftete Maus monoclonal anti--TSH im Puffer Tris-NaCl, der BSA enthält (Rinderserumalbumin). Enthält 0,1% Konservierungsmittel ProClin300.
• Substrat, 1 Phiole, 11ml, gebrauchsfertig, (tetramethylbenzidine) TMB.
• Stoppen Sie Lösung, 1 Phiole, 6,0 ml von 1 mol/l Schwefelsäure.
• Wäsche-Lösungs-Konzentrat, 1 Phiole, 25 ml (40X konzentrierte sich), PBS-Tweenwäschelösung.
• IFU, 1 Kopie.
• Platten-Deckel: 1-teilig.

Materialien erfordert (aber nicht zur Verfügung gestellt)
• Microplate-Leser mit saugfähiger Fähigkeit der Wellenlänge 450nm und 620nm.
• Microplate-Waschmaschine.
• Brutkasten.
• Plattenschüttel-apparat.
• Mikropipetten und Mehrkanalmikropipetten, die 50μl mit einer Präzision von besser als 1,5% liefern.
• Saugfähiges Papier.
• Destilliertes Wasser

3. Testverfahren

Stellen Sie sicher, dass der die Proben, die Kalibrierer und die Kontrollen Patienten bei Raumtemperatur (℃ 18-25) vor Maß sind. Mischen Sie alle Reagenzien durch vor Gebrauch leicht umwandeln.

• Verwenden Sie nur die Anzahl von den erforderten Brunnen und formatieren Sie die Brunnen der microplates, damit jeden Kalibrierer und Probe geprüft werden kann. • Fügen Sie µL 25 von Kalibrierern oder von Proben jedem Brunnen hinzu.

• Fügen Sie µL 100 des Enzymparonyms jedem Brunnen hinzu.

• Rütteln Sie das microplate leicht, damit 30 Sekunden mischen.

• Bedecken Sie die Platte mit einem Plattendeckel und brüten Sie an 37℃ für 60 Minuten aus.

• Werfen Sie den Inhalt der Mikroplatte durch Abschlämmung oder Aspiration weg. Beim Abfüllen, klopfen Sie und beflecken Sie das Plattentrockene mit saugfähigem Papier.

• Fügen Sie µL 350 der Wäschelösung hinzu, füllen Sie ab (Hahn und Fleck) oder saugen Sie an. Wiederholen Sie 4 zusätzliche Mal für insgesamt 5 Wäschen. Eine automatisierte microplate Streifenwaschmaschine kann benutzt werden. Am Ende der Reinigung, wandeln Sie die Platte um und klopfen Sie heraus jede Restwäschelösung auf saugfähiges Papier.

• Fügen Sie µL 100 des Substrates jedem Brunnen hinzu.

• Bedecken Sie und brüten Sie bei Raumtemperatur (18-25℃) in der Dunkelheit für Reaktion für 20 Minuten aus. Rütteln Sie die Platte nicht nach Teilstaatzusatz.

• Fügen Sie µL 50 der Endlösung jedem Brunnen hinzu.

• Rütteln Sie, damit 15-20 Sekunden die Flüssigkeit innerhalb der Brunnen mischen. Es ist wichtig, zu garantieren dass die blauen Farbänderungen, zum sich vollständig gelb zu färben.

• Lesen Sie die Absorption jedes Brunnens bei 450 Nanometer (unter Verwendung 620 bis 630 Nanometer als die Referenzwellenlänge, zum von wohlen Unvollkommenheiten herabzusetzen) in einem Mikroplattenleser. Die Ergebnisse sollten innerhalb 30 Minuten des Hinzufügens gelesen werden stoppen Lösung