Serum-Test ISO-Thyroxin-T4 Elisa Test Free T4 110 Minute-Lesezeit

Thyroxin T4
Hinweis: Tests DS177703 96

1. Beabsichtigter Gebrauch
Immunoassay für die quantitative in-vitrobestimmung des Thyroxins im menschlichen Serum.

2. Zusammenfassung
Das Hormonthyroxin (T4) ist das Hauptprodukt, das durch die Schilddrüse abgesondert wird und ist eine integrale Komponente des stabilisierten Systems der Hypothalamus-vorhergehenden Pituitärschilddrüse. Es hat die Funktion von Metabolismus aufbauend beeinflussen. Thyroxin wird in einer Kopplungsreaktion von zwei DIT-Molekülen (3,5-diiodotyrosine) in der Schilddrüse gebildet. Es ist gespeicherte Grenze zum Thyroglobulin im lumina der Schilddrüsenfollikel und wird wie erforderlich unter Einfluss TSH abgesondert. (1, 2) ist der Großteil (> 99%) des Gesamtthyroxins (T4) im Serum im Protein anwesend? Grenzform. Während die Konzentrationen der Transportproteine im Serum abhängig von den exogenen und endogenen Effekten sind, muss der Status der Bindeproteine in der Einschätzung der Schilddrüsenhormonkonzentration im Serum auch berücksichtigt werden. Wenn dieses ignoriert wird, Änderungen in den Bindeproteinen (z.B. wegen des Östrogens? das Enthalten von Vorbereitungen, während der Schwangerschaft oder in Anwesenheit eines nephrotischen Syndroms etc.) kann zu fehlerhafte Einschätzungen des metabolischen Zustandes der Schilddrüse führen. (3, 4, 5, 6, 7) kann die Bestimmung von T4 für die folgenden Anzeichen verwendet werden: die Entdeckung von Hyperthyreose, die Entdeckung von Primär- und Sekundärhypothyreose und die Überwachung der TSH-Unterdrückungstherapie. (8)
Die Probe T4 setzt eine wettbewerbsfähige Messgrundlage mit einem Antikörper ein, der speziell gegen T4 gerichtet wird. Endogenes T4, freigegeben durch die Aktion von 8 anilino-1-naphthalene Sulfosäure (amerikanischer Nationalstandard).

3. Reagens-Materialien stellten zur Verfügung
• Beschichteter Microplate, 8 X12 Streifen, 96 Brunnen, vorgalvanisiert mit T4 derivant.
• Kalibrierer, 6 Phiolen, 1 ml jedes, gebrauchsfertig; Konzentrationen: 0 (A), 2,5 (B), 5 (C), 10 (D), 15 (E) und 30 (F) μg/dL.
• Enzym-Paronym, 1 Phiole, 6,0 ml HRP (Meerrettichperoxydase) beschriftete Maus monoclonal T4 im Puffer Tris-NaCl, der BSA enthält (Rinderserumalbumin). Enthält 0,2% Konservierungsmittel ProClin300. Amerikanischer Nationalstandard 1,5 mg/ml.
• Substrat, 1 Phiole, 11ml, gebrauchsfertig, (tetramethylbenzidine) TMB.
• Stoppen Sie Lösung, 1 Phiole, 6,0 ml von 1 mol/l Schwefelsäure.
• Wäsche-Lösungs-Konzentrat, 1 Phiole, 25 ml (40X konzentrierte sich), PBS-Tweenwäschelösung.
• IFU, 1 Kopie.
• Platten-Deckel: 1-teilig.

4. Materialien erfordert (aber nicht zur Verfügung gestellt)
• Microplate-Leser mit saugfähiger Fähigkeit der Wellenlänge 450nm und 620nm.
• Microplate-Waschmaschine.
• Brutkasten.
• Plattenschüttel-apparat.
• Mikropipetten und Mehrkanalmikropipetten, die 50μl mit einer Präzision von besser als 1,5% liefern.
• Saugfähiges Papier.
• Destilliertes Wasser

Testverfahren

Stellen Sie sicher, dass der die Proben, die Kalibrierer und die Kontrollen Patienten bei Raumtemperatur (℃ 18-25) vor Maß sind. Mischen Sie alle Reagenzien durch vor Gebrauch leicht umwandeln.

• Verwenden Sie nur die Anzahl von den erforderten Brunnen und formatieren Sie die Brunnen der microplates, damit jeden Kalibrierer und Probe geprüft werden kann. • Fügen Sie µL 50 von Kalibrierern oder von Proben jedem Brunnen hinzu.

• Fügen Sie µL 50 des Enzymparonyms jedem Brunnen hinzu.

• Rütteln Sie das microplate leicht, damit 30 Sekunden mischen.

• Bedecken Sie die Platte mit einem Plattendeckel und brüten Sie bei ℃ 37 für 60 Minuten aus.

• Werfen Sie den Inhalt der Mikroplatte durch Abschlämmung oder Aspiration weg. Beim Abfüllen, klopfen Sie und beflecken Sie das Plattentrockene mit saugfähigem Papier.

• Fügen Sie µl 350 der Wäschelösung hinzu, füllen Sie ab (Hahn und Fleck) oder saugen Sie an. Wiederholen Sie 4 zusätzliche Mal für insgesamt 5 Wäschen. Eine automatisierte microplate Streifenwaschmaschine kann benutzt werden. Am Ende der Reinigung, wandeln Sie die Platte um und klopfen Sie heraus jede Restwäschelösung auf saugfähiges Papier.

• Fügen Sie µL 100 des Substrates jedem Brunnen hinzu.

• Bedecken Sie und brüten Sie bei Raumtemperatur (18-25℃) in der Dunkelheit für Reaktion für 20 Minuten aus. Rütteln Sie die Platte nicht nach Teilstaatzusatz. • Fügen Sie µL 50 der Endlösung jedem Brunnen hinzu.

• Rütteln Sie, damit 15-20 Sekunden die Flüssigkeit innerhalb der Brunnen mischen. Es ist wichtig, zu garantieren dass die blauen Farbänderungen, zum sich vollständig gelb zu färben.

• Lesen Sie die Absorption jedes Brunnens bei 450 Nanometer (unter Verwendung 620 bis 630 Nanometer als die Referenzwellenlänge, zum von wohlen Unvollkommenheiten herabzusetzen) in einem Mikroplattenleser. Die Ergebnisse sollten innerhalb 30 Minuten des Hinzufügens gelesen werden stoppen Lösung