• Bereiten Sie Reagenzien vor: Verdünnen Sie 1 Volumen konzentrierten Waschpuffers (20×) mit 19 Volumina destilliertem Wasser und mischen Sie es gut.
• Zugabe von Proben: Öffnen Sie die Foliebeutel und entfernen Sie die Mikroplatte. Setzen Sie 1 Brunnen als leere, 2 Brunnen als negative Kontrolle, 2 Brunnen als positive Kontrolle.50 μL Proben oder Negativkontrollen oder Positivkontrollen in die jeweiligen Bohrungen abgeben- Schwingt die Platte sanft.
• Inkubation: Decken Sie die Mikroplatte mit einem Plattendeckel ab und inkubieren Sie die beschichtete Mikroplatte in einem thermostatisch gesteuerten Wasserbad oder Mikroplatten-Inkubator bei 37°C für 60 Minuten.
• Waschen Sie die Platte: Entfernen Sie die Plattenhülle. Atmen Sie den Inhalt aller Brunnen aus. Füllen Sie die Brunnen mit dem verdünnten Waschpuffer (zu 10 ~ 20 Sekunden bis zum Einweichen) und atmen Sie erneut.Wiederholen Sie den Vorgang 5 Mal.- Stellen Sie sicher, dass das Ruhevolumen minimal ist, indem Sie die Platte auf absorbierendes Papier klopfen.
• Zusatz von Konjugat: Fügen Sie 100 μL Konjugat zu jeder Quelle (außer der leeren Quelle).
• Inkubation: Decken Sie die Mikroplatte ab und inkubieren Sie die Platte bei 37°C 30 Minuten lang.
• Waschen der Platte: Wiederholen Sie den Waschvorgang wie in Schritt 4.
• Substrat hinzufügen: 50 μl Substratlösung A und 50 μl Substratlösung B in jede Brunne hinzufügen, gut mischen, abdecken und 30 Minuten bei 37 °C inkubieren.
• Stop-Reaktion: 50 μl Stop-Lösung in jede Brunne hinzufügen und gut mischen.
• Die Absorbanz wird bei 450 nm abgelesen. Bei Verwendung einer doppelten Wellenlänge sollte die Referenzwellenlänge zwischen 620 nm und 690 nm gewählt werden.

Vorsichtsmaßnahmen

• Alle Komponenten des Kits müssen vor dem Gebrauch Raumtemperatur erreichen.
• Befolgen Sie die Anweisungen, um die Reaktionstemperatur und -zeit streng zu kontrollieren.
• Vermischen Sie keine Bestandteile mit unterschiedlichen Losnummern.
• Das Kit sollte bei 2-8°C aufbewahrt werden.