TB-IGRA ELISA TEST KIT

1. Prinzip

TB-IGRA ist ein in-vitro Diagnostiktest, der zellvermittelte Immunantworten auf Mycobacterium tuberculosis (MTB)-Infektionen nachweist, indem er Interferon-gamma (IFN-γ) misst, das von sensibilisierten T-Zellen nach Stimulation mit MTB-spezifischen Antigenen (z. B. ESAT-6, CFP-10 und TB7.7) freigesetzt wird.

2. Hauptmerkmale

• Hohe Spezifität:

  • Verwendet MTB-spezifische Antigene (fehlen in BCG und den meisten nicht-tuberkulösen Mykobakterien), wodurch falsch-positive Ergebnisse minimiert werden.

• Hohe Sensitivität:

  • Erkennt sowohl aktive TB als auch latente TB-Infektionen (LTBI) mit überlegener Genauigkeit im Vergleich zum Tuberkulin-Hauttest (TST).

• Quantitative/Qualitative Ergebnisse:

  • Die Ausgabe variiert je nach Plattform (z. B. Spot-Zählungen in ELISPOT-Assays oder IFN-γ-Konzentration in ELISA).

• Schnelle Bearbeitungszeit: Ergebnisse liegen in der Regel innerhalb von 24–48 Stunden vor.

3. Probenanforderungen

• Probentyp: Frisches peripheres Vollblut (Heparinisiert).

• Volumen: Normalerweise 1–3 ml pro Test (variiert je nach Kit-Hersteller).

• Lagerung: Innerhalb von 8–32 Stunden verarbeiten (je nach Kit-Spezifikationen).

4. Assay-Verfahren

1. Stimulation: Inkubation des Blutes mit MTB-Antigenen und Kontrollen (Negativ-/Mitogenkontrolle).

2. IFN-γ-Nachweis:

   • ELISPOT-basiert (z. B. T-SPOT.TB): Zählen von IFN-γ-sekretierenden T-Zellen als Spots.

   • ELISA-basiert (z. B. QuantiFERON-TB Gold): Messung der IFN-γ-Konzentration über einen Immunoassay.

3. Interpretation:

   • Ergebnisse werden mit Grenzwerten verglichen (variiert je nach Assay).

   • Unbestimmte Ergebnisse können eine erneute Testung erfordern.

5. Leistungskennzahlen

• Sensitivität: >90 % für aktive TB, ~80 % für LTBI.

• Spezifität: >95 % (unbeeinflusst durch BCG-Impfung).

• Kreuzreaktivität: Minimal mit nicht-tuberkulösen Mykobakterien (NTM).

6. Indikationen

• Screening auf LTBI in Hochrisikogruppen (z. B. HIV-Positive, immungeschwächte Patienten, enge Kontaktpersonen).

• Zusatztest zur Diagnose aktiver TB (muss mit klinischen Symptomen und anderen Tests korrelieren).

7. Vorteile gegenüber TST

• Keine Kreuzreaktivität mit BCG.

• Test in einer einzigen Sitzung (keine Rückkehr zum Ablesen).

• Objektive, laborbasierte Ergebnisse.

8. Einschränkungen

• Kann aktive TB nicht von LTBI unterscheiden.

• Benötigt spezielle Laborausrüstung.

• Höhere Kosten als TST.

• Potenzielle falsch-negative Ergebnisse bei immungeschwächten Patienten.

9. Kompatible Kits (Beispiele)

• T-SPOT.TB (Oxford Immunotec): ELISPOT-basiert.

• QuantiFERON-TB Gold Plus (Qiagen): ELISA-basiert.

10. Zulassungsstatus

• Zugelassen von FDA/CE/WHO für TB-Infektionsscreening.

In-vitro-Diagnostikum

Nur zur Verwendung

Dieses Kit enthält Reagenzien, die für die Testung von maximal 28 Proben in einem Testlauf ausreichen. Stimulationskomponenten:

1. Negativkontrolle (Grauer Deckel)

2. TB-Antigen, lyophilisiert (Lila Deckel)

3. TB-Antigen-Verdünnungsmittel (Lila Deckel)

4. Positivkontrolle (Roter Deckel) 28 Tests 28 Tests 0,9 ml 28 Tests

ELISA-Komponenten

1. Mikrotiterplatten-Streifen

2. Humanes IFN-γ-Standard, lyophilisiert (Blauer Deckel)

3. Verdünnungsmittel

4. Biotin-markierter Antikörper (Gelbe Kappe) 12x 8 Wells 2 x Fläschchen 1 x 40 ml 1 x 6 ml

5. Enzymkonjugat 100X Konzentrat (Braune Flasche) 1 x 130 μl

6. Waschpuffer 10X Konzentrat 1 x 40 ml

7. Chromogen-Lösung A

8. Chromogen-Lösung B

9. Stopplösung 1 x 6 ml 1 x 6 ml 1 x 6 ml

PRINZIP DES TESTS