2. Verdünnen Sie den Waschpuffer vor der Verwendung im Verhältnis 1:40 mit destilliertem Wasser.
3. Geben Sie 100 μl Probenverdünnungsmittel in die entsprechende Vertiefung (nicht in die leere Vertiefung hinzufügen, negativ).
Kontrollvertiefungen und Positivkontrollvertiefung.) Die Probe sollte der Anzahl der Mikro entsprechen
Platte, jede Platte sollte mit 2 Vertiefungen für die Negativkontrolle, 1 Vertiefung für die Positivkontrolle und Leerwert versehen sein
1 gut kontrollieren. Geben Sie 5 μL Probe in die entsprechende Vertiefung, mischen Sie gründlich mit der Pipette und fügen Sie hinzu
50 μl Negativkontrolle und Positivkontrolle in die Negativkontrollvertiefungen und die Positivkontrollvertiefung geben (nicht
fügen Sie den leeren Brunnen hinzu).
Hinweis: Verwenden Sie für jede Probe, Negativ- und Positivkontrolle, eine separate Entsorgungspipettenspitze
Vermeiden Sie Kreuzkontaminationen.
4. 30 Sekunden lang leicht schütteln und vermischen. 20 Minuten lang bei 37 °C mit der Dichtungsplattenmembran inkubieren
Versiegeln der Platte.
5. Am Ende der Inkubation die Plattenabdeckung entfernen und entsorgen. Herausnehmen, Waschpuffer hinzufügen
jede Vertiefung für 20 Sekunden. 5 Mal wiederholen. Drehen Sie den Teller nach dem letzten Spülgang um
Löschpapier oder ein sauberes Handtuch und klopfen Sie darauf, um eventuelle Rückstände zu entfernen.
6. Jeweils Zugabe von 50 µL Enzymkonjugat (nicht in die leere Vertiefung hinzufügen)
7. 20 Minuten lang bei 37 °C inkubieren, wobei die Dichtungsplattenmembran die Platte abdichtet. Wiederholen Sie das
Waschen Sie den Schritt fünfmal wie in Schritt 5.
8. Fügen Sie 50 µL Substrat A und 50 µL Substrat B hinzu (nicht in die leere Vertiefung hinzufügen). Bei 37 °C inkubieren
10 Minuten, wobei die Dichtungsmembran die Platte abdichtet.
9. Geben Sie 50 μl Stopplösung in jede Vertiefung (nicht in die leere Vertiefung). Vorsichtig durch Schütteln mischen, lesen
Absorption innerhalb von 10 Minuten nach Stoppen der Reaktion. Kalibrieren Sie den Plattenleser mit dem Blank
gut aus und lesen Sie die Absorption bei 450 nm ab. Wenn ein Doppelfiltergerät verwendet wird, stellen Sie die Referenz ein
Wellenlänge bei 630 nm. Bei Verwendung einer Dual-Wellenlänge zur Erkennung ist kein Leerfeld zulässig. Berechnen Sie die
Grenzwert ermitteln und Ergebnisse auswerten.
Chronometrie: Lesen Sie die optische Dichte (OD) der Probe bei 450 nm mit einem Mikroplattenlesegerät ab.
Wenn der mittlere OD-Wert der Negativkontrolle ≤ 0,1 und der mittlere OD-Wert der Positivkontrolle ≥ 0,8 ist, ist der Test gültig.
andernfalls ist der Test ungültig.
Cut-Off-Wert (CO) = Der mittlere OD-Wert der Negativkontrolle x 3 (Berechnet mit 0,10, wenn der Mittelwert
Der OD-Wert der Negativkontrolle ist < 0,10, berechnet anhand des tatsächlichen Werts, wenn der mittlere OD-Wert der Negativkontrolle liegt
Wert ist > 0,10)
Positive Ergebnisse: OD-Wert der Probe ≥ CO
Ihre Nachricht muss zwischen 20 und 3.000 Zeichen enthalten!
German
