CMV IgG Elisa Test Kit

ANWENDUNGSGEBIET

Der CMV IgG Elisa Test dient zum Nachweis und zur quantitativen Bestimmung von IgG-Antikörpern gegen CMV in Humanserum.

ASSAY-VERFAHREN

• Reagenzien vorbereiten: 1 Teil Waschpuffer (20x) mit 19 Teilen destilliertem Wasser verdünnen, gut mischen.
• Proben hinzufügen: Beutel öffnen und Mikrotiterplatte entnehmen. 1 Vertiefung als Blindwert, 2 Vertiefungen als Negativkontrolle, 2 Vertiefungen als Positivkontrolle einrichten. Nach Zugabe von 100 μL Probenverdünnungsmittel 10 μL Probe, 100 μL Negativkontrolle oder Positivkontrolle in die entsprechenden Vertiefungen geben (ohne Probenverdünnungsmittel). Die Platte leicht vibrieren.
• Inkubieren: Mikrotiterplatte mit Plattenabdeckung abdecken und die Mikrotiterplatte in einem thermostatgesteuerten Wasserbad oder Mikrotiterplatteninkubator bei 37 °C für 30 Minuten inkubieren.
• Platte waschen: Plattenabdeckung entfernen. Inhalt aller Vertiefungen absaugen. Die Vertiefungen mit dem verdünnten Waschpuffer füllen (10-20 Sekunden einwirken lassen) und dann erneut absaugen. Vorgang 5 Mal wiederholen. Sicherstellen, dass das Restvolumen minimal ist, indem die Platte auf saugfähiges Papier getippt wird.
• Konjugat hinzufügen: 100 μL Konjugat zu jeder Vertiefung geben (außer der Blindwert-Vertiefung).
• Inkubieren: Mikrotiterplatte abdecken und die Platte bei 37 °C für 30 Minuten inkubieren.
• Platte waschen: Waschvorgang wie in Schritt 4 wiederholen.
• Substrat hinzufügen: 50 μL Substratlösung A und 50 μL Substratlösung B zu jeder Vertiefung geben, gut mischen. Abdecken und bei 37 °C für 15 Minuten inkubieren.
• Reaktion stoppen: 50 μL Stopplösung zu jeder Vertiefung geben, gut mischen.
• Die Absorption bei 450 nm ablesen. Wenn eine Doppelwellenlängenmessung verwendet wird, sollte die Referenzwellenlänge von 620 nm bis 690 nm gewählt werden.

Lagerung

• Bei 2-8 °C lagern.

• Unbenutzte Vertiefungen in den wiederverschließbaren Aluminiumfolienbeutel legen und bei 2-8 °C zurücklegen. Unter diesen Bedingungen bleiben die Vertiefungen 2 Monate stabil oder bis zum aufgedruckten Verfallsdatum, je nachdem, was früher eintritt.

• Unbenutzte Kalibratoren versiegeln und bei 2-8 °C zurücklegen. Unter diesen Bedingungen bleibt die Stabilität 1 Monat erhalten. Für eine längere Verwendung geöffnete Kalibratoren in Aliquots einfrieren und bei -20 °C lagern. Mehrfaches Einfrieren und Auftauen vermeiden.

• Alle anderen unbenutzten Reagenzien versiegeln und bei 2-8 °C zurücklegen. Unter diesen Bedingungen bleibt die Stabilität 2 Monate erhalten oder bis zum aufgedruckten Verfallsdatum, je nachdem, was früher eintritt.