Nur für In-vitro-Diagnostik und professionelle Anwendung.
Name
Anti-Ct IgG ELISA Testkit (Serum/Plasma)
ANWENDUNGSGEBIET
Dieses Kit dient zum qualitativen Nachweis von Chlamydia trachomatis (Ct) IgG in menschlichem Serum/Plasma. Das Kit ist
für das klinische Screening und die Diagnose von Ct-Infektionen in Serum/Plasma geeignet.
TESTPRINZIP
Ct-Antigen ist in fester Phase auf der Polystyrol-Reaktionsmikroplatte adsorbiert. Wenn im Testpräparat ein Ct-IgG-Antikörper
vorhanden ist, bindet er an das mit Ct-Antigen beschichtete Mikrotiterplättchen, bildet einen Antigen-Antikörper-Komplex und
bindet dann an den enzymmarkierten Antikörper und bildet auf der Oberfläche
der Mikrotiterplatte einen Antigen-Antikörper-Antikörper-Komplex, der durch die Wirkung des Substrats in der entsprechenden Vertiefung eine blaue Farbe anzeigt. Daher kann er spezifisch das Ct-IgG in menschlichem Serum/Plasma nachweisen.
TESTVERFAHREN
1. Alle Reagenzien vor Gebrauch 15 Minuten lang auf Raumtemperatur bringen.
2. Den Waschpuffer vor Gebrauch im Verhältnis 1:40 mit destilliertem Wasser verdünnen.
3. 100μL Probenverdünnungsmittel in die entsprechende Vertiefung geben (Nicht in die Blindvertiefung, die Negativkontrollvertiefungen und die Positivkontrollvertiefung geben). Die Probe sollte der Anzahl der Mikrotiterplatten entsprechen, jede Platte sollte mit 2 Negativkontrollvertiefungen, 1 Positivkontrollvertiefung und 1 Blindkontrollvertiefung versehen sein. 5μL Probe in die entsprechende Vertiefung geben, gründlich mit der Pipette mischen, 50μL Negativkontrolle und Positivkontrolle in die Negativkontrollvertiefungen und die Positivkontrollvertiefung geben (Nicht in die Blindvertiefung geben).
Hinweis: Verwenden Sie für jede Probe, jede Negativ- und Positivkontrolle eine separate Einwegpipettenspitze, um Kreuzkontaminationen zu vermeiden.
4. Sanft schütteln, um 30 Sekunden lang zu mischen. Bei 37°C 20 Minuten lang mit der Versiegelungsfolie
inkubieren.
5. Am Ende der Inkubation die Plattenabdeckung entfernen und wegwerfen. Entnehmen Sie die Platte, geben Sie Waschpuffer in
jede Vertiefung für 20 Sekunden. 5 Mal wiederholen. Nach dem letzten Waschzyklus die Platte umdrehen und auf
Filterpapier oder ein sauberes Handtuch legen und abklopfen, um Rückstände zu entfernen.
6. Jeweils 50µL Enzymkonjugat zugeben (Nicht in die Blindvertiefung geben)
7. Bei 37°C 20 Minuten lang mit der Versiegelungsfolie inkubieren. Den Waschschritt wie in Schritt 5 5 Mal wiederholen.
8. 50µL Substrat A und 50µL Substrat B zugeben (Nicht in die Blindvertiefung geben). Bei 37°C 10 Minuten lang
mit der Versiegelungsfolie inkubieren.
9. 50μL Stopplösung zu jeder Vertiefung geben (Nicht in die Blindvertiefung geben). Durch Schütteln sanft mischen, die
Absorption innerhalb von 10 Minuten nach Stoppen der Reaktion ablesen. Kalibrieren Sie den Plattenleser mit der Blind
Vertiefung und lesen Sie die Absorption bei 450 nm ab. Wenn ein Dualfiltergerät verwendet wird, stellen Sie die Referenz
Wellenlänge auf 630 nm ein. Wenn die Doppelwellenlängenmessung verwendet wird, ist keine Blindvertiefung zulässig. Berechnen Sie den
Grenz- und bewerten Sie die Ergebnisse.
INTERPRETATION DER ERGEBNISSE
Chronometrie: Lesen Sie die optische Dichte (OD) der Probe bei 450 nm mit einem Mikrotiterplattenleser ab.
Der mittlere OD-Wert der Negativkontrolle ≤ 0,1 und der mittlere OD-Wert der Positivkontrolle ≥ 0,8, der Test ist gültig,
andernfalls ist der Test ungültig.
Grenz-Wert (C.O.) = Der mittlere OD-Wert der Negativkontrolle x 3 (Berechnet als 0,10, wenn der mittlere
OD-Wert der Negativkontrolle
< 0,10, berechnet als tatsächlicher Wert, wenn der mittlere OD-Wert der Negativkontrolle
größer als 0,10 ist)
Positive Ergebnisse: Proben-OD-Wert ≥ C.O.